[صفحه اصلی ]   [Archive] [ English ]  
:: صفحه اصلي :: درباره نشريه :: آخرين شماره :: تمام شماره‌ها :: ثبت نام :: ارسال مقاله :: جستجو :: تماس با ما ::
:: دوره 7، شماره 4 - ( مهر-آبان1392 1392 ) ::
جلد 7 شماره 4 صفحات 81-88 برگشت به فهرست نسخه ها
طراحی واکنش زنجیره‌ای پلی‌مراز بهبودیافته جهت تشخیص مولکولی باکتری استرپتوکوکوس نیومونیا
فهیمه آقامیری1، محمد سلیمانی1، امیرحسین محسنی1، کیوان مجیدزاده* 2
1- آزاد اسلامی، واحد قم
2- دانشگاه علوم پزشکی آجا ایران ، kmajidzadeh@razi.tums.ac.ir
چکیده:   (1410 مشاهده)

زمینه و هدف: باکتری استرپتوکوکوس نیومونیا عامل مننژیت باکتریایی و یک عامل مهم مرگ و میر در کودکان و افراد سالخورده است. کنترل این بیماری نیز وابسته به تشخیص سریع باکتری می‌باشد. روش‌های تشخیص این باکتری شامل رنگ‌آمیزی گرم، کشت و تست‌های سرولوژیکی است. این روش‌ها وقت‌گیر و در اثر مصرف آنتی‌بیوتیک منجر به نتایج منفی کاذب می‌شوند. در حال حاضر، روش‌های مولکولی مانند PCR به‌صورت روزانه برای تشخیص عوامل عفونی استفاده می‌شوند. این مطالعه با هدف طراحی یک واکنش بهبودیافته PCR جهت تشخیص باکتری استرپتوکوکوس نیومونیا صورت گرفت.

روش بررسی: پرایمرهای تشخیصی اختصاصی براساس ژن ply باکتری طراحی گردید. پس از تکثیر ژن هدف در DNA ژنومی باکتری، محصول PCR در پلاسمید pTZ57R/T کلون شد و پلاسمید تأییدشده pTZ-ply به‌عنوان کنترل مثبت در آزمایشهای بعدی مورد استفاده قرار گرفت. جهت تعیین حساسیت واکنش، رقت‌های متوالی 10 تایی از پلاسمید pTZ-ply تهیه و بر روی آنها واکنش PCR انجام گرفت. برای تعیین ویژگی واکنش از ژنوم تعدادی باکتری‌ مرتبط یا غیرمرتبط در واکنش  PCRاستفاده شد.

یافته‌ها: نتایج PCR مطابق انتظار، قطعه 727 جفت باز را نشان داد. هیچ‌گونه تکثیری در PCR بر روی ژنوم باکتری‌های کنترل منفی دیده نشد. این نتایج نشان‌دهنده ویژگی بالای واکنش PCR بود. پایین‌ترین حد تشخیص این آزمون در تشخیص ژن ply، 250 کپی از ژن در یک واکنش 25 میکرولیتری بود.

نتیجه‌گیری: حساسیت، ویژگی و سرعت بالای آزمون طراحی‌شده، آن را به‌عنوان یک تست مناسب برای استفاده در آزمایشگاه‌های کلینیکی مطرح می‌کند. همچنین ارزیابی بیشتر این آزمون با استفاده از نمونه‌های کلینیکی یا مواد آلوده‌شده مصنوعی، کاربرد این روش را در مجموعه‌‌ای کلینیکی تأیید خواهد کرد.

واژه‌های کلیدی: واکنش زنجیره‌ای پلی‌مراز؛ واکنش زنجیره‌ای پلی‌مراز- روش‌ها؛ تشخیص سریع؛ استرپتوکوکوس نیومونیا
متن کامل [PDF 302 kb]   (362 دریافت)    
نوع مطالعه: مقاله پژوهشي |
دریافت: ۱۳۹۵/۱/۱۸ | پذیرش: ۱۳۹۵/۱/۱۸ | انتشار: ۱۳۹۵/۱/۱۸
ارسال پیام به نویسنده مسئول

ارسال نظر درباره این مقاله
نام کاربری یا پست الکترونیک شما:

CAPTCHA code


XML   English Abstract   Print


Download citation:
BibTeX | RIS | EndNote | Medlars | ProCite | Reference Manager | RefWorks
Send citation to:

Aghamiri F, Soleimani M, Mohseni A H, Majidzade K. Design of an Improved Polymerase Chain Reaction (PCR) Assay for Molecular Detection of Streptococcus pneumonia. Qom Univ Med Sci J . 2013; 7 (4) :81-88
URL: http://journal.muq.ac.ir/article-1-555-fa.html

آقامیری فهیمه، سلیمانی محمد، محسنی امیرحسین، مجیدزاده کیوان. طراحی واکنش زنجیره‌ای پلی‌مراز بهبودیافته جهت تشخیص مولکولی باکتری استرپتوکوکوس نیومونیا. مجله دانشگاه علوم پزشکی قم. 1392; 7 (4) :81-88

URL: http://journal.muq.ac.ir/article-1-555-fa.html



دوره 7، شماره 4 - ( مهر-آبان1392 1392 ) برگشت به فهرست نسخه ها
مجله دانشگاه علوم پزشکی قم Qom University of Medical Sciences Journal
Persian site map - English site map - Created in 0.17 seconds with 30 queries by YEKTAWEB 3749