اثر اگزامات بر فعالیت آنزیم LDH-C4 اسپرم در موش صحرایی چکیده زمینه و هـدف:LDH-C4 به عنوان یکی از ایزوآنزیم‌های لاکتات دهیدروژناز، در بیضه‌ی بالغ و اسپرماتوزوییدهای بسیاری از گونه‌ها مشاهده شده است. عملکرد فیزیولوژیک این ایزوآنزیم نشان‌دهنده‌ی نقش آن در ایجاد انرژی جهت تحرک و بقای اسپرم می‌باشد. در این مطالعه، اثر اگزامات به عنوان مهارکننده‌ی اختصاصی ایزوآنزیم 4C-LDH به صورت In Vivo در موش صحرایی مورد بررسی قرار گرفت. روش بـررسی: ابتدا 20 سر موش صحرایی بالغ به چهار گروه مساوی تقسیم گردید. یک گروه به عنوان گروه کنترل فقط سالین دریافت کردند؛ و به سه گروه دیگر مقادیر مختلف اگزامات (600، 300، 150 میلی‌گرم بر کیلوگرم) روزانه به مدت 45 روز به روش داخل صفاقی تزریق شد. در ادامه موش‌ها را با استفاده از کلروفرم کُشته و دم اپی‌دیدیم آن‌ها جدا گردید. سپس در دم اپی‌دیدیم چند برش ایجاد نموده و جهت خروج اسپرم قطعات اپی‌دیدیم در محیط کشت T6 در دمای 37 درجه‌ی سانتی‌گراد و CO2 5% به مدت یک‌ساعت قرار داده شد، استخراج آنزیمLDH-C4 بر اساس روش اروین گلدبرگ انجام گرفت، و مقدار پروتئین با روش لوری اندازه‌گیری شد. عمل خالص‌سازی نسبی طی 2 مرحله شامل رسوب دادن آنزیم به کمک سولفات آمونیوم و کروماتوگرافی روی ستون حاوی DEAE-SEPHADEX-A50 صورت گرفت. در تمام مراحل استخراج، مقدار پروتئین و فعالیت آنزیمLDH توتال در گروه‌های دریافت‌کننده‌ی دارو مشخص شده، و سپس با گروه کنترل مقایسه گردید. یافـته‌ها: در این مطالعه فعالیت کل آنزیم LDH-C4 در گروه کنترل Unit3/08/11 و در گروه‌های دریافت‌کننده‌ی اگزامات به ترتیب با افزایش غلظت اگزامات (150، 300 و 600 میلی‌گرم بر کیلوگرم)، 3/03/8، 2/09/6 و 1/02/3 واحد(Unit) مشاهده شد. هم‌چنین در غلظت 600 میلی‌گرم بر کیلوگرم اگزامات، فعالیت آنزیم در حدود 63% نسبت به گروه کنترل مهار گردید. نتیجه‌گیری: این پژوهش نشان داد که اگزامات به طریقIn vivo فعالیت آنزیم LDH-C4 را کاهش می‌دهد و این تأثیر با افزایش غلظت متناسب می‌باشد. لذا با توجه به اثر بازدارنده‌ی رقابتی اگزامات بر LDH-C4 این ماده می‌تواند به عنوان ماده‌ی ضد بارداری در مردان مورد استفاده قرار گیرد. کلید واژه‌ها: لاکتات دهیدروژنز c4؛ اگزامات؛ اسپرم؛ موش. Abstract Background and Objectives: LDH-C4 is one of the lactate dehydrogenase isoenzymes found in mature testis and spermatozoa of many species. The Physiological function of these isoenzymes indicates its role in creating energy for sperm motility and survival. In this research the effects of oxamate as specific inhibitors of the LDH-C4 of rat were studied in vivo. Methods: A total of 20 adult rats were divided into four equal groups. One group as the control group received saline only and different amounts of oxamate were injected into other three groups (600 300 150mg/kg) daily for 45 days intraperitoneally. The rats were then killed with chloroform and the caudal part of epididym was separated. By making several cuts in caudal part of the epididymis the sperms were isolated and put in T6 medium+5mg/ml-1 BSA. Later the sperms were incubated under 37ºC and 5% CO2 for one hour. LDH-C4 enzyme was extracted using the Erwin Goldberg and the protein amounts were measured by Lowry's method. Relative purification was done in two stages including ammonium sulfate precipitation and column chromatography by DEAE-Sephadex-A50. All stages of extraction the amount of total protein LDH enzyme activity in the oxamate-exposed groups and specified recipient were then compared with the control group. Results: In this study the total enzyme LDH-C4 activity in the control group was 11.8±0.3 and the oxamate recipient groups (150 300 and 600mg/kg) were 8.3±0.3 6.9±0.2 and 3.2±0.1 IU respectively. The concentration of 600mg/kg oxamate was inhibited about 63% enzyme activity compared to control group. Conclusion: This study showed that the oxamate may reduce in vivo enzyme activity through LDH-C4 with increasing concentration and this effect is proportional. Therefore with the effect of the competitive inhibitors of oxamate on LDH-C4 this substrate can be used as a contraceptive for males. Keywords: LDH-C4; Oamate; Sperm; Rat. لاکتات دهیدروژنز c4؛ اگزامات؛ اسپرم؛ موش LDH-C4; Oamate; Sperm; Rat 3 10 Gh Saki قاسم ساکی ghasemsaki@yahoo.com No J Saki جواد ساکی No M Kadkhoe Elyaderani منیژه کدخدایی الیادرانی No F Rahim فاخر رحیم No S R Kalantar Mahdavi سید رشیدالدین کلانتر مهدوی No