بررسی اثر نوروتروفیک Silibinin بر تمایز سلول‌های بنیادی فولیکول چکیده زمینه و هدف: ناحیه‌ی Bulge فولیکول مو به دلیل دسترسی آسان به سلول‌های بنیادی چند استعدادی (Multipotent) اهمیت ویژه‌ای دارد، و بیان‌کننده‌ی مارکر نستین (پروتئین مربوط به سلول‌های بنیادی عصبی) می‌باشد. سلول‌های بنیادی در این ناحیه با قدرت و توانایی بالا قادر به تمایز به انواعی از سلول‌های عصبی هستند. Silibinin نیز به عنوان ماده‌ی مؤثره‌ی گیاه خار مریم (Silybummarininum) دارای خصوصیات آنتی‌اکسیدانی، نوروتروفیکی و حفاظت‌کننده‌ی سلول‌های عصبی است. هدف از این مطالعه، بررسی افزایش تعداد سلول‌های نورونی تمایزیافته از سلول‌های بنیادی فولیکول مو در اثر مجاورت با Silibinin می‌باشد. روش بررسی: ابتدا ناحیه‌ی Bulge فولیکول موی سبیل (Vibrissa) موش صحرایی به وسیله‌ی پنس جراحی جدا گردید و سپس سلول‌های جدا شده به مدت یک هفته در مجاورت محیط DMEM/F12 و فاکتور رشد اپیدرمی (EGF) کشت داده شدند. در ادامه سلول‌ها را در پلیت‌های محتوی فاکتورهای نوروتروفین (Neurotrophin-3) و Silibinin با غلظت‌های (05/0، 1/0، 4/0، 5/0، 7/0میکروگرم بر میلی‌لیتر) به مدت 2 هفته قرار داده، و مقایسه آن‌ها با یکدیگر صورت گرفت. سلول‌های پیش‌ساز عصبی در ناحیه‌ی Bulge و سلول‌های بنیادی تمایزیافته به نورون‌ها به ترتیب با استفاده از آنتی‌بادی نستین (Nestin) و آنتی‌بادی بتا تری توبولین (β III Tubulin) با تکنیک ایمونوسیتوشیمی بررسی شدند، مقایسه‌ی یافته‌ها با استفاده از آزمون تی انجام گردید، و 05/0P< سطح معنی‌دار اختلاف‌ها تلقی شد. یافته‌ها: در این پژوهش مارکر نستین در ناحیه‌ی Bulge طی هفته‌ی اول به وضوح بیان شد، و پس از مدت 2 هفته هم‌زمان با روند تمایز سلول‌های بنیادی به سلول‌های عصبی نورون، بیان آنتی‌بادی بتا تری توبولین در سلول‌های عصبی مشاهده گردید. Silibinin در غلظت 1 میکروگرم بر میلی‌لیتر بر روی سلول‌های بنیادی کاملاً اثر سمی داشت و رشد سلول‌ها را در همان هفته‌ی اول متوقف نمود. حداکثر تمایز در غلظت 5/0 میکروگرم بر میلی‌لیتر به طور معنی‌دار مشاهده گردید (05/0P Neurotrophic Effects of Silibinin on Differentiation of Hair Follicle Stem Cells to NeuronsAbstract Background and Objectives: Hair Follicle Bulge region due to its availability and abundance is one of the areas which is easily accessible to Multi-potent stem cells that expresses Nestin marker (neuronal stem cells protein). Stem cells bulge region in hair follicle stem cells has high potency to be differentiated to neuronal cells. Silibinin as an active component of Silybum marianum has anti-oxidant anti-inflammatory anti-carcinogenic hepatoprotective neurotrophic and neuroprotective effects. The aim of the present study was to evaluate the neurotrophic effects of silibinin on differentiation of hair follicle stem cells to neurons. Methods: Bulge area of whiskers in Rat was isolated and cultivated three weeks in supplemented DMEM/F12 and epidermal growth factor (EGF). Then the cells were exposed over the concentrations of 0.05μg/ml 0.1μg/ml 0.4μg/ml 0.5µg/ml 0.7µg/ml Silibinin and Neurotrophin-3. Two weeks after culture plated bulge cells were immunostained with Nestin and differentiated stem cells were immunostained with β III tubulin by immunocytochemistry techniques. The results were evaluated by T-test student analysis. A Pvalue less than 0.05 was considered significant. Result: The nestin marker was clearly demonstrated in bulge regions during the first week but after two weeks parallel to stem cells differentiating neuronal cells β III tubulin marker was expressed in neuronal cells. The toxic effects of 1μg/ml Silibinin on stem cells were also demonstrated and it stopped the cell growth at the end of the first week. The maximum differentiation on stem cells in 0.5μg/ml Silibinin was observed to be significant (P نستین؛ بتا تری توبولین؛ سیلی بینین؛ فولیکول مو Nestin; β III-Tubulin; Silibinin; Hair Follicle 19 27 S Asalgoo سارا آسال گو No M Nobakht ملیحه نوبخت manob@iums.ac.ir No N Rahbar Roshandel ناهید رهبر روشندل No K Mousavizadeh کاظم موسوی زاده No N Najafzadeh نوروز نجف زاده No B Kordestani Shargh بهاره کردستانی شرق No