Qom University of Medical Sciences Journal

fa بررسی ارتباط بیان ژن MLH1 و فاکتورهای پاتولوژیکی در بیماران ایرانی مبتلا به سرطان کلورکتال MLH1 Gene Expression and Pathologic Factors in Iranian Patients with Colorectal Cancer ژنتیک ژنتیک مقاله پژوهشي Original Article زمینه و هدف: ژن MLH1 (MutL homolog 1) عنصر اصلی هترودایمر MutLα بوده و در ترمیم عدم تطابق باز- باز و لوپ حذف و اضافه نقش دارد. هنگاهی که پروتئین MLH1 حضور ندارد، تعداد خطاهایی که تعمیر نشده باقی می‌مانند، افزایش می‌یابد و این مهم می‌تواند منجر به ایجاد تومور در بدن شود. در این راستا، پژوهش حاضر با هدف بررسی کمی بیان ژن  MLH1در نمونه خون بیماران ایرانی مبتلا به سرطان کلورکتال (CRC: Colorectal Cancer) و ارتباط آن با فاکتورهای مراحل پیشرفت تومور به لایه‌های دیواره روده (T) و مراحل تهاجم به گره لنفاوی (N) انجام شد. روش بررسی: در این مطالعه نمونه‌ خون 33 بیمار مبتلا به سرطان کلورکتال جمع‌آوری شد. استخراج RNA (Ribonucleic acid) و ساخت cDNA (Complementary DNA) مطابق با پروتکل کیت صورت گرفت. پرایمر به روش Exon-Exon Junction طراحی شد و آزمون Real Time PCR (Real-time Polymerase Chain Reaction) برای ژن‌های MLH1 و β–actin (Beta-actin) به صورت سه بار تکرار انجام شد. آنالیز نهایی نتایج با استفاده از نرم‌افزار Rest 2009 صورت گرفت و از آزمون T برای بررسی بیان ژن  MLH1و ارتباط آن با فاکتورهای T و N در نمونه‌های موجود استفاده گردید. یافته‌ها: نتایج حاصل از Real Time PCR 33 بیمار با میانگین سنی 55 سال و درصد فراوانی 5/42 زن و 5/57 مرد، کاهش معنادار بیان ژن MLH1 را در مراحل بالای بیماری نشان داد (*05/0>P). همچنین ارتباط کاهش بیان این ژن با فاکتورهای  T(*05/0>P) و N (*05/0>P) معنادار بود. نتیجه‌گیری: بر مبنای نتایج، ارتباط مستقیمی ‌‌میان کاهش بیان ژنMLH1  و مراحل بالای سرطان کلورکتال مشاهده شد و ارتباط آن با فاکتورهایT  و N در تعدادی از بیماران ایرانی مبتلا به سرطان کلورکتال بررسی و تأیید گردید. Background and Objectives: MutL homolog (MLH1) is a key component of heterodimeric complex MutLα, which recognizes and repairs base-base mismatches or insertion/deletion loops that arise from nucleotide misincorporation. In the absence of MLH1 protein, the number of unrepaired mismatches will increase and cause tumors in organs. The present study aimed at quantitative analysis of MLH1 gene expression and its association with depth of tumor invasion (T) and lymph node invasion (N) factors in blood samples of Iranian patients with colorectal cancer (CRC).   Methods: Blood samples from 33 patients with CRC were collected. RNA (Ribonucleic acid) was extracted and cDNA (Deoxyribonucleic acid) was fabricated according to the kit protocol extracted. The primer was designed by the Exon-Exon Junction method, and Real-time Polymerase Chain Reaction (Real-Time PCR) test was performed three times for MLH1 and β-actin (Beta-actin) genes. Data were analyzed in  REST 2009 Software, and a T-test was used to evaluate the expression of MLH1 gene and its association with T and N factors.   Results: The results of Real-Time PCR in 33 patients with the male to female ratio of 42.5% to 57.5% and a mean age of 55 years demonstrated a significant decrease in MLH1 gene expression in the late stages of the disease (P<0.05 *). Furthermore, the reduction of expression in this gene was associated with T (P <0.05*) and N factors (P<0.05 *).   <pre> Conclusion: As evidenced by the obtained results, a direct relationship was observed between decreased expression of MLH1 gene and late stages of colorectal cancer. Moreover, the association of this gene with T and N factors was investigated and confirmed in several Iranian patients with colorectal cancer.</pre>   بیان ژن, تعمیر ناسازگاری DNA, سرطان کلورکتال, واکنش زنجیره‌ای پلیمراز در زمان واقعی, MLH1 Colorectal cancer, DNA mismatch repair, Gene expression, MLH1, Real-time polymerase chain reaction 62 70 http://journal.muq.ac.ir/browse.php?a_code=A-10-2067-1&slc_lang=fa&sid=1 Ahdieh Hosseini Anvari عهدیه حسینی انواری ah.ha0098@gmail.com 0000-0003-1277-8322 No Department of Genetics, Faculty of Sciences, Islamic Azad University, Qom Branch گروه ژنتیک، دانشکده علوم پایه، دانشگاه آزاد اسلامی، واحد قم Shahla Mohammad Ganji شهلا محمد گنجی shahla@nigeb.ac.ir 0000-0003-2032-8209 Yes Molecular Medicine Department, National Institute of Genetic Engineering and Biotechnology گروه پزشکی مولکولی، پژوهشکده بیوتکنولوژی پزشکی، پژوهشگاه ملی مهندسی ژنتیک و زیست فناوری Tahereh Ahdieh Hosseini Komeili Movahhed طاهره کمیلی موحد t_Komeili_M@yahoo.com 0000-0002-2210-7541 No Cellular and Molecular Research Center, Qom University of Medical Sciences مرکز تحقیقات سلولی و مولکولی، دانشگاه علوم پزشکی قم