fa بررسی مولکولی ژن oapA در سویه‌های هموفیلوس آنفلوانزای ایزوله‌شده از ایران، به‌عنوان کاندید در طراحی واکسن بومی ‌علیه این باکتری مقاله پژوهشي Original Article <p>زمینه و هدف: باکتری هموفیلوس آنفلوانزا می‌تواند به‌عنوان پاتوژن بخش تنفسی انسان عمل کند. عفونت‌ ناشی از این باکتری به‌طور سنتی به‌وسیله آنتی‌بیوتیک‌ها‌ درمان می‌شود. استفاده از واکسن‌های کونژوگه در مهار بیماری‌های ناشی از این باکتری نیز بسیار موفقیت‌آمیز بوده است. در طراحی این واکسن‌ها از کپسول پلی‌ساکاریدی هموفیلوس آنفلوانزا و پروتئین‌های ایمونوژن استفاده می‌شود. این مطالعه با هدف بررسی مولکولی ژن oapA به‌عنوان ژن پروتئین ایمونوژنیک حفاظت‌شده و کاندید در طراحی واکسن انجام شد. روش بررسی: تعدادی سویه بالینی هموفیلوس آنفلوانزا از بیمارستان میلاد در تهران تهیه و پس از انجام تست‌های تشخیصی موجود، تست‌های بیوشیمیایی جهت تشخیص بیوتایپ سویه‌ها انجام گرفت. در ادامه، DNA از طریق جوشاندن، استخراج و واکنش PCR اختصاصی جهت آنالیز مولکولی ژن oapA طراحی گردید. در نهایت، تعیین توالی محصولات PCR، به‌منظور تأیید نتایج صورت گرفت. یافته‌ها: نتایج واکنش PCR نشان داد 79% از سویه‌های مورد بررسی، حدود 99-95% به توالی‌های نوکلئوتیدی ژن oapA هموفیلوس آنفلوانزا در NCBI شباهت دارند و21% باقیمانده از سویه‌هادارای یک حذف حدود 125 نوکلئوتیدیبوده و 96-94% شبیه به توالی‌های موجود در NCBI هستند. در همه سویه‌هایی که این حذف 125 نوکلئوتیدی را نشان دادند (سویه‌های&nbsp;&nbsp; non-typeable &nbsp;و سویه‌های تیپ b) شباهت 99-95% برقرار بود.نتایج تعیین بیوتایپ نشان داد سویه‌های مورد مطالعه، مربوط به بیوتایپ‌های مختلف می‌باشد. نتیجه‌گیری: طبق نتایج این مطالعه پیشنهاد می‌شود استفاده از پروتئین ژن حفاظت‌شده oap A در تولید واکسن علیه تیپ b این باکتری بیشتر مورد توجه قرار گیرد. کلید واژه‌ها: هموفیلوس آنفلوانزا ؛ ژن oapA ؛ واکنش زنجیره‌ای پلیمراز.</p> <p><strong><em>Background and Objectives:</em></strong><em>Haemophilusinfluenzae</em> is a bacterium that can act as a pathogen of human respiratory tract. Its infections have been traditionally treated with antibiotics, and then the use of conjugate vaccines has been very successful in prevention of infectious diseases. These vaccines consisted of capsular polysaccharide of <em>H. influenzae</em>with an immunogenic protein. The aim of this study was molecular analysis of <em>oapA</em>gene in Iranian<em>H. influenzae</em> strains as a conserve immunogenic protein for vaccine candidate.</p> <p></p> <p><strong><em>Methods:</em></strong>Clinical<em>H. influenzae</em> strains were collected from Milad Hospital in Tehran, and cultured on chocolate agar. After diagnostic test, biochemical tests were performed for distinguishing strains biotype. The DNA extracted by boiling method and specific PCR reactions were designed for <em>oapA</em>gene molecular analysis. Finally sequencing of PCR products was performed for confirming our results.</p> <p></p> <p><strong><em>Results:</em></strong> The results of PCR exhibited that 79% of clinical samples had 95-99% similarity to NCBI sequences of <em>H. influenzaeoapA</em> gene, and the remaining 21% had a 125 nucleotide deletion and 94-96% similarity to NCBI sequences. Also this study showed that all strains having 125 nucleotide deletion (Nontypeable<em>H. influenzae</em>and <em>H. influenzae</em> type b) had 95-99% similarity to NCBI sequences. The results of determining the biotype revealed that the studied strains were related to different biotypes.</p> <p></p> <p><strong><em>Conclusion:</em></strong> The results of this study suggested that use of <em>oapA</em> gene protein for production of vaccine against <em>H. influenzae</em> type b be further considered.&nbsp;</p> هموفیلوس آنفلوانزا؛ ژنoapA؛واکنش زنجیره‌ای پلیمراز H. influenza,oapAgene,PCR 17 25 http://journal.muq.ac.ir/browse.php?a_code=A-10-100-206&slc_lang=fa&sid=1 Parisa Rahimi پریسا رحیمی No Alzahra University دانشگاه الزهرا Parichehr Hanachi پریچهر حناچی hanachi_wrc@yahoo.com Yes Alzahra University دانشگاه الزهرا Saeed Bouzari سعید بوذری No Pasteur Institute of Iran انستیتوپاستور ایران Seyed Davar Siadat سید داور سیادت No Pasteur Institute of Iran انستیتوپاستور ایران