دوره 12، شماره 12 - ( اسفند 1397 )                   جلد 12 شماره 12 صفحات 52-42 | برگشت به فهرست نسخه ها

XML English Abstract Print

Download citation:
BibTeX | RIS | EndNote | Medlars | ProCite | Reference Manager | RefWorks
Send citation to:
Rahnamaei Yahyaabadi. S, Honari H, Abdollahi M, Aghaie S M, Ebrahimi M. Subcloning and Expression of ML1-stxB Fusion Gene of Mistletoe Lectin in E. coli and Production of its Antibody in Mouse. Qom Univ Med Sci J 2019; 12 (12) :42-52
URL: http://journal.muq.ac.ir/article-1-1920-fa.html
رهنمایی یحیی آبادی سهیلا، هنری حسین، عبدالهی مسعود، آقایی سید مجتبی، ابراهیمی محمد علی. زیرهمسانه‌سازی و بیان ژن ممزوجی M‌L1-stxB دارواش در E. Coli و تولید آنتی‌بادی آن در موش سوری. مجله دانشگاه علوم پزشکی قم. 1397; 12 (12) :42-52

URL: http://journal.muq.ac.ir/article-1-1920-fa.html

زیرهمسانه‌سازی و بیان ژن ممزوجی M‌L1-stxB دارواش در E. Coli و تولید آنتی‌بادی آن در موش سوری
سهیلا رهنمایی یحیی آبادی1 ، حسین هنری* 2، مسعود عبدالهی3 ، سید مجتبی آقایی3 ، محمد علی ابراهیمی1
1- دانشگاه پیام نور
2- گروه زیست‌شناسی، دانشکده علوم پایه، دانشگاه جامع امام‌حسین(ع) ، honari.hosein@gmail.com
3- گروه زیست‌شناسی، دانشکده علوم پایه، دانشگاه جامع امام‌حسین(ع)
چکیده:   (4642 مشاهده)
زمینه و هدف: عصاره برگ‌های دارواش (Viscum album L) دارای پروتئین MLI از نوع RIP2 (پروتئین‌های غیرفعال ریبوزومی تیپ 2) با خواص لکتینی هستند. STxB شیگا توکسین به‌عنوان یک ایمونواجوانت و حامل، مطرح بوده و به گیرنده سطح سلولی خود به‌نام Gb3 متصل می‌گردد که روی اکثر سلول‌های بدن بیان می‌شود. در این مطالعه، بیان آنتی‌ژنML1-stxB  در E. coli و تولید آنتی‌بادی آن در موش سوری بررسی گردید.
روش بررسی: در این مطالعه تجربی، پلاسمید pUC57 حاوی ژن MLI با جایگاه‌های آنزیمی NdeI و SalI در وکتور بیانی pET28a(+)-stxB، زیرهمسانه‌‌سازی شد و به باکتری E. coli سویه BL21(DE3) تراریخت (ترانسفورم) گردید. بیان کاست ژنی MLI-StxB تحت القایIPTG  انجام گرفت. پس از تخلیص، پروتئین نوترکیب MLI-STxB به‌وسیله ستون نیکل کروماتوگرافی در چهار نوبت متوالی به موش‌های سوری تزریق شد.
یافته‌ها: در این مطالعه، ژن ML1-stxB کلون‌شده در وکتور بیانی pET28a(+)، با واکنش PCR و آنالیز آنزیمی تأیید گردید. همچنین پروتئین نوترکیب تولیدشده به‌وسیله SDS-PAGE و لکه‌گذاری وسترن مورد تأیید قرار گرفت، سپس آنتی‌بادی تولیدشده از سرم موش جداسازی و با روش تست ELISA بررسی گردید.
نتیجه‌گیری: براساس نتایج این مطالعه، پروتئین ML1 دارای خاصیت غیرفعال‌کننده ریبوزومی و STxB نقش یاوری و حاملی دارد؛ لذا این پروتئین نوترکیب، کاندیدای واکسن علیه سم دارواش شیگلا دیسانتری بوده که از آنتی‌بادی آن می‌توان به‌عنوان شناساگر استفاده کرد.
واژه‌های کلیدی: اشرشیاکلی، زیرهمسانه سازی، دارواش، شیگلا.
متن کامل [PDF 1145 kb]   (1107 دریافت) |   |   متن کامل (HTML)  (960 مشاهده)  
نوع مطالعه: مقاله پژوهشي | موضوع مقاله: ژنتیک
دریافت: 1396/8/30 | پذیرش: 1397/4/13 | انتشار: 1398/2/18
ارسال نظر درباره این مقاله : نام کاربری یا پست الکترونیک شما:
CAPTCHA
ارسال پیام به نویسنده مسئول

بازنشر اطلاعات
Creative Commons License این مقاله تحت شرایط Creative Commons Attribution-NonCommercial 4.0 International License قابل بازنشر است.

کلیه حقوق این وب سایت متعلق به مجله دانشگاه علوم پزشکی قم می باشد.

طراحی و برنامه نویسی : یکتاوب افزار شرق
© 2025 CC BY-NC 4.0 | Qom University of Medical Sciences Journal

Designed & Developed by : Yektaweb