مجله دانشگاه علوم پزشکی قم

زمینه و هدف: جنس شیگلا یکی از عوامل اصلی بیماری اسهال در انسان و باسیلوس آنتراسیس عامل سیاه‌زخم (یک بیماری مشترک بین انسان و دام) می‌باشد. یکی از مهم‌ترین فاکتورهای بیماریزایی شیگلا، پروتئین IpaD است. همسانه‌سازی N ترمینال ژن ipaD به همراه ژن pa20 که دارای نقش ایمنی‌زایی است، به‌عنوان کاندید واکسن نوترکیب می‌تواند مطرح باشد. در این مطالعه بیان ژن ممزوجی دومن -a1 آنتی‌ژن حفاظتی (PA20) باسیلوس آنتراسیس و N- ترمینال  ipaD شیگلا در اشرشیاکلی بررسی شد. روش بررسی : در این مطالعه تجربی، طراحی پرایمر برای ژن‌ pa20 صورت گرفت و جهت تکثیر این قطعه، واکنش PCR انجام شد. سپس قطعه تکثیرشده به درون pGEM-T Easy Vector Systems همسانه‌سازی شد. ژن‌ pa20 به‌وسیله آنزیم‌های محدودالاثر EcoRI و XhoI برش‌خورده و در نهایت، ژن‌ pa20 به ژن ipaD ممزوج شد. وکتور pET28a(+) حاوی کاست ژنی ipaD-pa20 ساخته‌شده به باکتری E. coli سویه BL21(DE3) تراریخت و بررسی بیان کاست ژنی انجام گرفت. یافته‌ها: در این مطالعه، ژن‌های ممزوجی ipaD-pa20 در وکتور بیانی pET28a(+) به‌وسیله PCR و هضم آنزیمی تأیید گردید. همچنین پروتئین نوترکیب تولیدشده به‌وسیله SDS-PAGE و لکه‌گذاری وسترن تأیید شد. نتیجه‌گیری: با توجه به شناسایی آنتی‌ژن PA به‌وسیله آنتی‌بادی PA20 و خاصیت القای آپاپتوز آن و خاصیت ایمنی‌زایی آنتی‌ژن ipaD تولیدشده، به‌عنوان کاندید واکسن نوترکیب علیه انواع شیگلا و باسیلوس آنتراسیس می‌تواند مطرح باشد.