دوره 13، شماره 9 - ( آذر 1398 )
جلد 13 شماره 9 صفحات 33-19 |
برگشت به فهرست نسخه ها
Download citation:
BibTeX | RIS | EndNote | Medlars | ProCite | Reference Manager | RefWorks
Send citation to:
BibTeX | RIS | EndNote | Medlars | ProCite | Reference Manager | RefWorks
Send citation to:
Parvand M, Nemati Mansour F, Amani J. Design and Production of Recombinant TAT Protein Structure, Catalytic Domain of Diphtheria Toxin, and Evaluation of Its Effect on Cell Line . Qom Univ Med Sci J 2019; 13 (9) :19-33
URL: http://journal.muq.ac.ir/article-1-2501-fa.html
URL: http://journal.muq.ac.ir/article-1-2501-fa.html
پروند محدثه، نعمتی منصور فهیمه، امانی جعفر. طراحی و تولید سازه نوترکیب پروتئین TAT و بخش عملکردی سم دیفتریا و ارزیابی عملکرد آن بر روی لاین سلولی. مجله دانشگاه علوم پزشکی قم. 1398; 13 (9) :19-33
محدثه پروند1 
، فهیمه نعمتی منصور1 ، جعفر امانی* 2
، فهیمه نعمتی منصور1 ، جعفر امانی* 2
1- گروه بیوتکنولوژی، دانشکده علوم و فناوری‌های نوین، واحد علوم دارویی، دانشگاه آزاد اسلامی
2- مرکز تحقیقات میکروبیولوژی کاربردی، انستیتو سیستم بیولوژی و مسمومیت‌ها، دانشگاه علوم پزشکی بقیه‌الله (عج) ،jafar.amani@gmail.com
2- مرکز تحقیقات میکروبیولوژی کاربردی، انستیتو سیستم بیولوژی و مسمومیت‌ها، دانشگاه علوم پزشکی بقیه‌الله (عج) ،
چکیده: (4228 مشاهده)
زمینه و هدف: سرطان، یکی از مهلک‌ترین بیماری‌هایی است که در عصر حاضر وجود دارد و درمان‌های مرسوم به آن نیز دارای موفقیت کمی بوده است. توکسین درمانی سرطان، از روش‌های درمانی نوینی است که موردتوجه متخصصان ساخت دارو قرار گرفته است. توکسین باکتری دیفتری شامل: سه بخش عملکردی، انتقال‌دهنده و اتصال‌دهنده بوده که بخش عملکردی آن باعث مهار سنتز پروتئین و مرگ سلول می‌‌شود. این مطالعه با هدف تولید بخش عملکردی توکسین دیفتری به همراه پپتید نفوذکننده TAT و بررسی میزان کشندگی آن بر روی لاین سلولی صورت گرفت.
روش بررسی: در این مطالعه، طراحی پرایمر برای قطعه ژنی tat-diph انجام شد و سازه ژنی حاوی توالی زنجیره عملکردی توکسین دیفتری و توالی پپتید TAT، تکثیر و در ناقل بیانی پروکاریوت،a 28pET حاوی دنباله هیستیدین کلون گردید. بعد از انتقال به میزبان باکتریایی (E.coli DE 21 BL 3)، القای بیان با IPTG صورت گرفت. سپس پروتئین حاصل تخلیص شد و پروتئین نوترکیب با کمک آنتی‌بادی ضد هیستیدین متصل به HRP با استفاده از تکنیک وسترن‌بلات تأیید گردید. در مرحله بعد، میزان کشندگی پروتئین کایمریک تولیدشده بر روی رده سلولی 7MCF با روش MTT مورد ارزیابی قرار گرفت.
یافته‌ها: نتایج حاصل از MTT نشان داد پروتئین نوترکیب TAT-Diph می‌تواند رده سلولی سرطانی 7MCF را از بین ببرد.
نتیجه‌گیری: نتایج این مطالعه نشان داد پروتئین نوترکیب با بخش عملکردی توکسین دیفتری و پپتید TAT، می‌تواند بر روی رده سلولی 7MCF اثر کشندگی داشته باشد.
روش بررسی: در این مطالعه، طراحی پرایمر برای قطعه ژنی tat-diph انجام شد و سازه ژنی حاوی توالی زنجیره عملکردی توکسین دیفتری و توالی پپتید TAT، تکثیر و در ناقل بیانی پروکاریوت،a 28pET حاوی دنباله هیستیدین کلون گردید. بعد از انتقال به میزبان باکتریایی (E.coli DE 21 BL 3)، القای بیان با IPTG صورت گرفت. سپس پروتئین حاصل تخلیص شد و پروتئین نوترکیب با کمک آنتی‌بادی ضد هیستیدین متصل به HRP با استفاده از تکنیک وسترن‌بلات تأیید گردید. در مرحله بعد، میزان کشندگی پروتئین کایمریک تولیدشده بر روی رده سلولی 7MCF با روش MTT مورد ارزیابی قرار گرفت.
یافته‌ها: نتایج حاصل از MTT نشان داد پروتئین نوترکیب TAT-Diph می‌تواند رده سلولی سرطانی 7MCF را از بین ببرد.
نتیجه‌گیری: نتایج این مطالعه نشان داد پروتئین نوترکیب با بخش عملکردی توکسین دیفتری و پپتید TAT، می‌تواند بر روی رده سلولی 7MCF اثر کشندگی داشته باشد.
نوع مطالعه: مقاله پژوهشي |
موضوع مقاله:
سلولی و مولکولی
دریافت: 1398/3/9 | پذیرش: 1398/7/23 | انتشار: 1398/9/10
دریافت: 1398/3/9 | پذیرش: 1398/7/23 | انتشار: 1398/9/10
ارسال پیام به نویسنده مسئول
| بازنشر اطلاعات | |
 |
این مقاله تحت شرایط Creative Commons Attribution-NonCommercial 4.0 International License قابل بازنشر است. |
حق تالیف (کپی رایت) برای مولفان محفوظ است.
صاحب امتیاز: دانشگاه علوم پزشکی قم
ناشر: انتشارات دانشگاه علوم پزشکی قم
شاپا چاپی: 7799-1375
شاپا الکترونیک: 1375-2008
ایمیل مجله: journal@muq.ac.ir
j.muq.ac@gmail.com
